Analisi diretta rapida e affidabile dei pesticidi polari negli spinaci

• Non comporta processi di derivatizzazione o accoppiamenti ionici che richiedono tempo, né lunghe attese per l’equilibratura della colonna.
• La fase stazionaria rappresenta una soluzione unica e offre una buona ritenzione e un’eluizione efficiente, ottenendo una buona forma del picco.
• La robusta prestazione della colonna garantisce cromatografie stabili e risultati affidabili.

L’analisi diretta dei pesticidi polari, come il glifosato, il suo principale metabolita (l’AMPA) e il glufosinato, risulta difficoltosa perché queste sostanze non sono trattenute in maniera ottimale sulle colonne a fase inversa e la chelazione con le superfici metalliche nel sistema LC-MS/MS può ridurre significativamente la risposta. Per migliorare le prestazioni in genere si utilizzano la derivatizzazione e i reagenti di coppia ionica, che tuttavia richiedono più tempo per la preparazione del campione e possono produrre spiacevoli effetti collaterali (precipitati, lunghi tempi di equilibratura, contaminazione del sistema, ecc.).

L’uso di una colonna Raptor Polar X rappresenta una soluzione ottimale perché l’innovativa fase stazionaria offre un’interazione più forte con i composti polari anionici. Presenta modalità di ritenzione ibride (HILIC e a scambio ionico) e offre una forte ritenzione pur consentendo una veloce eluizione degli analiti in picchi di forma simmetrica attraverso semplici modifiche della fase mobile. In questa analisi dei pesticidi polari negli spinaci si riscontra un’eccellente prestazione cromatografica per tutti e tre i composti con un tempo di analisi complessivo di appena otto minuti. Inoltre la forma dei picchi e i tempi di ritenzione rimangono stabili dopo centinaia di iniezioni di matrice, una semplice sostituzione della precolonna ripristina la piena rispondenza prestazionale. Questo flusso di lavoro veloce, semplice ed efficace rappresenta una buona alternativa per i laboratori alimentari interessati all’analisi diretta dei pesticidi polari senza dover ricorrere a procedure lunghe e complesse.

	Peaks	Conc. (ng/mL)	Precursor Ion	Product Ion 1	Product Ion 2	Product Ion 3
1.	AMPA	100	110.10	79.05	63.10	81.10
2.	Glufosinate	100	180.20	85.15	95.10	-
3.	Glyphosate	100	168.10	63.05	79.05	-

Column	Raptor Polar X (cat.# 9311A32)
Dimensions:	30 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:	2.7 µm
Pore Size:	90 Å
Guard Column:	Raptor Polar X guard column cartridge 5 mm, 2.1 mm ID, 2.7 µm (cat.# 9311A0252)
Temp.:	35 °C
Standard/Sample	Spinach extract
Inj. Vol.:	2 µL
Mobile Phase
A:	Water, 0.5% formic acid
B:	Acetonitrile, 0.5% formic acid
	Time (min) Flow (mL/min) %A %B 0.00 0.5 35 65 5.0 0.5 90 10 6.5 0.5 90 10 6.51 0.5 35 65 8 0.5 35 65

Detector	MS/MS
Ion Mode:	ESI-
Mode:	MRM
Instrument	UHPLC
Sample Preparation	Frozen spinach was added to a Blixer processor with dry ice (3:1-4:1 ratio) and then ground into a very fine powder. The homogenate was placed into the freezer immediately. A 5.0 gram sample of the spinach powder was weighed into a 50 mL centrifuge tube (cat.# 25846). According to the QuPPe method (Quick Polar Pesticides Method), 5.0 mL of methanol with 1.0% formic acid was added into the centrifuge tube. The tube was shaken by hand for 1 min and then by a mechanical shaker vigorously for 5 min. After centrifuging for 10 min at 4200 rpm, the supernatant was filtered through a 0.22 μm filter (cat.# 23984). The final extract was fortified with the AMPA, glufosinate, and glyphosate at a final concentration of 100 ng/mL.

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