Schnelle Direktanalyse underivatisierter Aminosäuren in Säuglingsanfangsnahrung
Vorgestellte Applikation: Underivatisierte Aminosäuren auf Raptor Polar X
- Einfache One-Step-Probenvorbereitung für die Direktanalyse underivatisierter Aminosäuren.
- Gleichzeitige Analyse nichtpolarer, polarer, positiv geladener und negativ geladener Aminosäuren in einem kurzen 10-minütigen Lauf.
- Sorgfältig entwickelter Gradient trennt Kontaminanten von den Zielanalyten.
Um sicherzustellen, dass der Nährstoffbedarf erfüllt wird, werden zuverlässige Analysemethoden für die genaue Bestimmung freier Aminosäuren in Säuglingsanfangsnahrung benötigt. Ein typischer Ansatz ist eine Vorsäulenderivatisierung gefolgt von einer Reversed-Phase-LC-Analyse, wobei die Derivatisierung aufgrund der mangelnden Retention und schlechten Empfindlichkeit der freien Aminosäuren erforderlich ist. Diese Methoden sind jedoch oft zeitaufwendig und arbeitsintensiv. Die Verwendung von perfluorierten Säuren als Ionenpaarreagenzien zur Verbesserung der Retention von underivatisierten Aminosäuren auf einer C18-Säule ist eine weitere häufig verwendete Methode; dieses Verfahren kann sich aber negativ auf das chromatographische System und das Massenspektrometer auswirken.
Beim hier vorgestellten einfacheren Verfahren können underivatisierte Aminosäuren im Anschluss an eine One-Step-Probenvorbereitung direkt bestimmt werden, wenn eine Raptor Polar X-Säule in Verbindung mit einem MS/MS-Detektor verwendet wird. Raptor Polar X-Säulen besitzen eine Hybrid-Phasenchemie (HILIC und Ionenaustausch), die das für die gleichzeitige Analyse einer Vielzahl von Analyten erforderliche ausgewogene Retentionsverhalten bereitstellt. Underivatisierte Aminosäuren mit nichtpolaren, polaren, positiv geladenen und negativ geladenen Seitenketten wurden ausreichend retardiert und dann mithilfe eines 10-minütigen Gradienten schnell eluiert. Dieser Gradient war außerdem in der Lage, Kontaminanten von den Zielanalyten zu trennen, was die Methode robuster macht. Zeitaufwendige und arbeitsintensive Verfahren zur Probenvorbereitung, die auch teure Derivatisierungskits einschließen können, lassen sich so durch eine einfache Proteinfällung und Direktanalyse des resultierenden Extrakts ersetzen. Die Direktanalyse underivatisierter Aminosäuren auf einer Raptor Polar X-Säule liefert ausgezeichnete Ergebnisse in einem schnellen einfachen Arbeitsablauf und ist damit eine vorteilhafte Alternative zu herkömmlichen Methoden.
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