Konditionieren Ihres LC-Geräts und der Säule für HILIC

Beschreibung

HILIC steht für „Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography“ und ist eine leistungsstarke spezielle Form der Flüssigkeitschromatografie (LC), bei der polare stationäre Phasen und eine anfängliche mobile Phase mit hohem organischem Anteil zur Trennung polarer Analyte verwendet werden. Aufgrund der überwiegend organischen Anfangsbedingungen ist es wichtig, das Gerät und die Säule zu konditionieren, um optimale Performance zu erhalten. Wie das geht, zeigen wir in diesem Video.

Weitere Informationen

• How to Avoid Common Problems with HILIC Methods
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Transkript

Jetzt haben Sie also eine neue HILIC-Säule und möchten gern eine HILIC-Analyse entwickeln oder durchführen. Was sollten Sie zuallererst tun?

Wie bereits für HILIC-basierte LC-Trennungen erläutert, ist der Anfangseluent eine mobile Phase mit hohem organischen Anteil, wobei auf der Oberfläche der polaren stationären Phase eine wässrige Schicht vorliegt. Zwischen einzelnen Läufen muss die Säule konditioniert und dann wieder äquilibriert werden, um die Wasserschicht auf der Partikeloberfläche wiederherzustellen. Wenn Sie erstmals eine neue HILIC-Säule benutzen oder die Zusammensetzung der mobilen Phase ändern möchten, sollten Sie die Säule mit wenigstens 50 Volumina der mobilen Phase durchspülen. Außerdem sollten mindestens 10 Leerinjektionen mit dem kompletten Elutionsprogramm durchgeführt werden, bevor Sie einen neuen Chargenlauf starten. Die Äquilibrierungszeit zwischen einzelnen Injektionen könnte stark vom jeweiligen Analyten abhängig sein. Deshalb sollten Sie die Reproduzierbarkeit der Retentionszeiten beobachten, um so die zur erneuten Äquilibrierung erforderliche Zeit zu bestimmen.

Außerdem sollten Sie nicht vergessen, dass neben der Säule selbst auch Ihr LC-System für die HILIC-Analyse konditioniert werden muss. Wir wissen, dass LC-Geräte normalerweise für LC-Analysen im Umkehrphasenbetrieb verwendet werden.
Bevor Sie auf die HILIC-Analyse umsteigen, vergessen Sie also bitte nicht, Ihr System mit einer mobilen Phase mit hohem organischem Anteil 30 bis 60 Minuten lang durchzuspülen. 

Wenn Sie sowohl Ihre Säule als auch Ihr System auf diese Weise für die HILIC-Analyse konditioniert haben, können Sie Ihre Arbeit in Angriff nehmen. Wenn Ihnen diese Videos gefallen, denken Sie bitte an die „Gefällt mir“-Angabe und teilen und abonnieren Sie sie. Sie können das nachstehende Kommentarfeld verwenden, um uns Ihre Ideen für künftige TechTipps mitzuteilen. Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit und bis zum nächsten Mal.